Peptidi neoantigenici per l'immunoterapia contro il cancro

Peptidi neoantigenici|Sintesi personalizzata del peptide neoantigenico|Personalizzazione del peptide lungo/insolubile|Scienza-Peptide

Hai bisogno di peptidi neoantigenici di alta qualità per un vaccino personalizzato contro il cancro o per lo screening delle cellule T-? Science-Peptide fornisce un servizio di sintesi del peptide neoantigene, che supporta peptidi lunghi, sequenze refrattarie, modifica multi-sito, elevata purezza, consegna rapida, per aiutare la ricerca sull'immunoterapia tumorale. Non esitare a contattarci.

Come sa chiunque si occupi di immunoterapia tumorale, trovare un buon bersaglio non è facile e anche sintetizzare i peptidi neoantigenici previsti di alta qualità è una sfida. Questi peptidi sono spesso lunghi, insolubili e contengono amminoacidi idrofobici, impossibili da sintetizzare con i normali metodi di sintesi. Operiamo nel campo dei peptidi da 20 anni e abbiamo ricevuto molti ordini per peptidi neoantigenici e abbiamo incontrato tutti i tipi di difficoltà - alcuni devono essere consegnati in tempo per la finestra terapeutica del paziente, alcuni peptidi non possono essere agitati bene nell'acqua e alcuni hanno diversi siti di mutazione affollati insieme. Sono state queste esperienze che ci hanno portato a costruire un sistema di sintesi specifico per i peptidi neoantigeni e ogni passaggio, dalla progettazione del percorso alla strategia di purificazione, era finalizzato alla risoluzione dei problemi.

I peptidi neoantigeni sono semplicemente frammenti proteici unici prodotti da mutazioni nelle cellule tumorali. Queste mutazioni includono mutazioni puntiformi, delezioni di inserzione e fusioni geniche che danno luogo a sequenze di aminoacidi diverse da quelle delle cellule normali. Quando questi peptidi vengono presentati alla superficie cellulare dalle molecole MHC, il sistema immunitario riconosce che "questo è un male" e attacca.

In pratica, i peptidi neoantigeni si dividono in due categorie principali:

Peptidi lunghi (25-35 aa):incapsulano il sito della mutazione e le sequenze circostanti, devono essere inghiottite dalle cellule dendritiche, elaborate e quindi presentate, comunemente utilizzate nei vaccini personalizzati.

Peptidi corti (8-11 aa):epitopi di legame MHC predetti o convalidati che possono essere utilizzati per stimolare direttamente le cellule T o per la tetramerizzazione.

Indipendentemente dal fatto che si tratti di un peptide lungo o di un peptide corto, i sintetizzatori di Neoantigen Peptide hanno gli stessi grattacapi: la sequenza è idrofobica, è facile essere "colpiti" dal sintetizzatore, la resa è bassa durante la purificazione e deve essere consegnato in tempo per il trattamento del paziente.

1. Specializzato in peptidi lunghi e insolubili
Gran parte dei peptidi neoantigenici che arrivano a noi hanno più di 25 aminoacidi. I metodi convenzionali sono spesso inefficaci nel trattare questi peptidi. Nel corso degli anni, abbiamo escogitato alcuni modi per affrontarli:

• Frammentazione: il lungo peptide viene tagliato in più segmenti e sintetizzato separatamente, ciascun segmento viene prima purificato e poi assemblato su resina o in fase liquida. In questo modo la qualità di ogni segmento è garantita e la resa e la purezza del prodotto finale sono più elevate.
• Sintesi assistita dalle microonde-: alcuni amminoacidi sono riluttanti a reagire con il riscaldamento a microonde, l'efficienza della reazione aumenterà immediatamente e ci saranno meno sottoprodotti-.
• Purificazione speciale dei solventi: alcuni peptidi non sono solubili nei comuni solventi, quindi aggiungiamo DMSO, guanidina cloridrato e altri solventi forti durante la purificazione per lavarli via dalla colonna e possono comunque mantenere buone proprietà dopo la liofilizzazione.

2. Non manca un singolo sito di mutazione
L'essenza dei peptidi neoantigeni risiede in quei pochi siti di mutazione che non possono mai essere confusi durante la sintesi. Utilizziamo la sintesi in fase solida-Fmoc per introdurre direttamente amminoacidi non-naturali e teniamo d'occhio i dati dopo ogni fase di accoppiamento per assicurarci che le sequenze di amminoacidi dei siti di mutazione siano esattamente le stesse del progetto.

3. La velocità è difficile
La finestra terapeutica per i pazienti affetti da tumore è così ampia che i peptidi non hanno alcun significato se arrivano in ritardo. Abbiamo dato il via libera ai peptidi Neoantigen:

• Peptidi corti (<20 aa): 10 working days
• Peptidi lunghi (20-35 aa): 12-18 giorni lavorativi
• Rapido: 7 giorni lavorativi sono negoziabili se sei davvero di fretta

L’anno scorso c’era un cliente che aveva già organizzato i suoi pazienti e aspettava i peptidi per fare un vaccino. Molti dei nostri sintetizzatori hanno lavorato a turni per fornirgli tutti i 30 peptidi entro due settimane.

4. Criteri rigorosi di purezza e endotossine
Quando usi qualcosa sulle persone, non puoi permetterti di scendere a compromessi sulla qualità. Offriamo peptidi neoantigeni:

• Purity:>90%, >95%, >98% Qualunque cosa tu scelga
• Endotossina:<2 EU/mg, or customized according to customer requirements
• Limite microbico: secondo Farmacopea
• Solventi residui: in conformità con ICH Q3C

Il rapporto COA di ogni peptide è accompagnato da grafici HPLC e MS e i dati possono essere tracciati, quindi molti clienti li prendono direttamente e li inseriscono nella dichiarazione.

5. Si può anche fare la toelettatura
Alcuni esperimenti richiedono un "manico" per i peptidi neoantigeni:

• Etichettatura della biotina: per tetramero MHC
• Etichettatura fluorescente (FITC, TAMRA, Cy5): per la colorazione a flusso-attraverso
• Accoppiamento delle proteine ​​trasportatrici (KLH, BSA): per l'immunizzazione degli animali
• Modificazione dell'acido palmitico: rendere i vaccini migliori nel trovare i linfonodi

Possiamo fare tutto insieme, senza che tu debba trovare due fornitori.

1. 20 anni di esperienza e molti problemi difficili
Siamo in questo campo da 20 anni e abbiamo incontrato tutti i tipi di peptidi difficili e abbiamo un modo per gestire catene lunghe, sequenze idrofobiche e ripetitive comuni ai peptidi neoantigenici e non vi diremo facilmente che non possiamo farlo. Alcuni peptidi che altri pensano non possano essere prodotti, spesso riusciamo a trovare una via d'uscita dopo alcuni giorni di ricerca.

2. Tenere il passo con il ritmo del trattamento
La cura del tumore non può aspettare. Abbiamo accelerato-il programma relativo ai peptidi neoantigeni, dando priorità all'intero processo, dalla valutazione alla consegna. Molti clienti in seguito ci hanno detto che ci avevano scelto perché avevamo consegnato loro il peptide nel tempo necessario.

3. La qualità può essere verificata
Che si tratti di peptidi grezzi per la ricerca scientifica o di peptidi ad elevata purezza e a basso contenuto di endotossine per la ricerca preclinica, li trattiamo tutti allo stesso modo: non meno di un controllo di qualità e non meno di uno dei dati che dovrebbero essere forniti. Molti clienti copiano direttamente il nostro rapporto COA e lo inseriscono nei documenti della dichiarazione.

4. Dai milligrammi ai grammi, senza sostituzione
La diagnosi precoce è solo di pochi milligrammi, gli studi tossicologici sono di decine di grammi, gli studi clinici sono di centinaia di grammi - dall'inizio alla fine, possiamo prendere tutto. Non devi cambiare la stessa specie e non devi preoccuparti di questo.

5. La tua sequenza, come solo tu e io la conosciamo
La nuova sequenza antigenica è il patrimonio principale di ogni cliente. Firmiamo un accordo di riservatezza, le informazioni sul progetto sono note solo a poche persone nel team di progetto e il sistema di dati è sicuro. In tutti questi anni non si è mai verificata alcuna fuga.

Un'azienda di terapia cellulare:hanno un paziente con melanoma avanzato che attende un vaccino personalizzato. 30 peptidi lunghi, 25-35 aminoacidi, di cui 8 estremamente idrofobi, e la resa della purificazione con metodi ordinari è estremamente bassa. Abbiamo utilizzato la condensazione dei frammenti e solventi speciali per purificare i peptidi e li abbiamo consegnati tutti al cliente entro due settimane, e il livello dell'endotossina è stato controllato affinché fosse inferiore a 0,05 EU/mg. Successivamente, dopo il trattamento del paziente, diversi nuovi cloni antigene-specifici sono stati amplificati mediante test sulle cellule T e il cliente ci ha chiamato espressamente per dire che "la qualità del peptide ha aiutato molto".

Un istituto oncologico d'eccellenza: they want to screen a batch of neoantigen-reactive TCRs and need 200 predicted peptides (9-11 aa). We synthesized all the peptides in three weeks using a high-throughput platform, and each peptide was >Puro al 95% e confermato da MS. Il cliente ha utilizzato questi peptidi per produrre tetrameri e ha selezionato diversi TCR ad alta-affinità, che sono ora in fase di sviluppo preclinico.

Che tu abbia appena iniziato la ricerca preclinica o che tu sia già in una sperimentazione clinica e hai bisogno di un peptide personalizzato per un vaccino, Science-Peptide può gestirlo. Il nostro team tecnico è pronto ad ascoltare le vostre esigenze.