Metodo di produzione dell'ossitocina

Mar 16, 2026

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Estrazione dell'ossitocina: prendere 100 g di polvere essiccata di *Pterocarya stenoptera* e 30 g di polvere di quarzo, metterli in un mulino a sfere, aggiungere acqua distillata ed estrarre quattro volte utilizzando lo stesso metodo. La quantità di acqua distillata aggiunta è di 1,4 L due volte e di 1,3 L due volte. Ogni estrazione dura 45 minuti, seguita dalla centrifugazione. Raccogliere il liquido ed estrarre nuovamente il residuo. Unire i quattro estratti per ottenere la soluzione di ossitocina. Cioè: polvere essiccata di *Pterocarya stenoptera* [acqua, mulino a sfere] → estratto di ossitocina (separazione cromatografica).

 

Aggiungere 1500 g di zeolite sintetica pre-trattata a 20 litri di soluzione di acido acetico allo 0,25%, agitare e versare in una colonna di scambio. Quando la soluzione di acido acetico scende a 2-3 cm sopra la superficie della zeolite, aggiungere l'estratto. Raccogliere il liquido bianco torbido (contenente principalmente ossitocina, a causa del suo pI 7,7, mentre la vasopressina ha un pI 10,9, che lo rende facilmente adsorbito come ione positivo) ad una portata adeguata. Quando il livello dell'estratto scende sulla superficie della zeolite, aggiungere immediatamente acqua distillata e continuare a raccogliere il liquido torbido finché tutto il liquido non sarà fuoriuscito. La soluzione torbida è stata regolata a pH 3,5 con acido acetico glaciale, riscaldata rapidamente a 95 gradi in un bagnomaria e mantenuta per 3 minuti, quindi raffreddata rapidamente e refrigerata durante la notte. Il processo era: estratto di ossitocina [HAc, colonna di zeolite sintetica] → soluzione torbida [HAc, riscaldata] → soluzione di separazione (adsorbimento, eluizione). Il giorno successivo, la soluzione refrigerata è stata filtrata e al filtrato è stata aggiunta una sospensione di bentonite al 10% (3 mL per 100 mL) sotto agitazione. L'adsorbimento è stato effettuato per 1 ora, seguito da centrifugazione. Il surnatante è stato controllato con una soluzione di prova di acido solfosalicilico; nessuna precipitazione indicava un completo assorbimento. Se si verificava un adsorbimento incompleto, l'adsorbimento veniva ripetuto e le due precipitazioni dell'impasto liquido di bentonite venivano combinate. La bentonite è stata eluita quattro volte con acido acetico all'1% (rispettivamente 1,6 L, 1,4 L, 1,2 L e 0,8 L). Ciascun eluente è stato riscaldato a 80 gradi, è stato aggiunto clorobutanolo e la temperatura è stata ulteriormente aumentata a 95 gradi, quindi raffreddata rapidamente a 25 gradi. Gli eluenti sono stati filtrati o centrifugati e i quattro filtrati sono stati combinati per determinare la potenza e il limite di vasopressina. Cioè, la preparazione del liquido refrigerato [filtrazione] → filtrato [impasto di argilla saponosa] → adsorbente [1% HAc] → iniezione eluente di ossitocina.

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