Impurezze di tirzepatide

Impurità di tirzepatide|Controllo delle impurità del tilpeptide|Sintesi personalizzata delle impurità e conferma della struttura|Scienza-Peptide

Tirzepatide Impurities control - per la ricerca sulla qualità dei farmaci a doppio target GLP-1/GIP-, reporting sui farmaci generici.Science-Peptide fornisce sintesi personalizzata di impurità correlate ai tilpeptidi, inclusi peptidi di delezione, impurità ossidate, prodotti di esfoliazione degli acidi grassi, dimeri, ecc., con dati di conferma strutturale a supporto del tuo Possiamo supportare il tuo studio di spettroscopia delle impurità con conferma strutturale dati. Non esitare a contattarci.

Tirzepatide (Tirzepatide) è il doppio agonista GLP-1/GIP ideato da Eli Lilly ed è in piena attività da due anni. Ha un buon effetto nel ridurre lo zucchero e un forte effetto nel ridurre il peso ed è chiamata la versione aggiornata del "farmaco miracoloso per la perdita di peso". Molti produttori nazionali di farmaci generici peptidici stanno fissando questo: dopo la scadenza del brevetto, chi potrà per primo verificare la qualità della ricerca, chi avrà l'opportunità di accaparrarsi il primo generico.

 

Tuttavia, la qualità del tilpeptide non è così facile da studiare. È più complesso del simeticone, con 39 aminoacidi, una catena laterale di acido grasso (acido eicosandioico) e un linker. Le impurità che possono comparire durante il processo di sintesi sono molto più elevate di quelle dei normali peptidi. Peptidi mancanti, impurità ossidative, prodotti di rilascio di acidi grassi, dimeri, impurità correlate al linker- devono avere ciascuno un controllo, ciascuno deve essere chiaro.

 

Abbiamo accumulato molta esperienza nella sintesi di impurità peptidiche complesse. Ci siamo specializzati nello studio del tilpeptide e sappiamo quali sono le difficoltà nel suo profilo di impurità e quali sono gli elementi di controllo essenziali. Possiamo personalizzare la sintesi di vari controlli delle impurità tilpeptidiche in base alle vostre esigenze, con dati di conferma della struttura e aiutarvi a stabilire il metodo in modo che vi sia meno probabilità che vi venga rilasciato un supplemento al momento della presentazione.

La struttura molecolare del tilpeptide determina che il suo profilo di impurità è molto più complesso di quello dei peptidi generali. Quando eseguiamo studi sulle impurità, ci concentriamo principalmente su queste categorie:

Peptide mancante
I 39 aminoacidi, ognuno dei quali viene perso durante il processo di sintesi, sono un'impurità. I tempi di ritenzione dei peptidi mancanti sull'HPLC erano ampiamente distribuiti, con diversa polarità dei peptidi mancanti in diverse posizioni. Alcuni mancano all'estremità N-terminale, alcuni al centro e altri vicino al sito di attacco degli acidi grassi. Abbiamo ricevuto un ordine da un cliente per 15 peptidi mancanti in diverse posizioni per localizzare tutte le possibili impurità mancanti nel loro processo.

Impurità ossidanti
Incontrato nella sequenza del tilpeptide è suscettibile all'ossidazione a solfossido e quindi a solfone. Le impurità ossidate compaiono spesso negli studi sulla stabilità e crescono dopo un periodo di tempo. Abbiamo fatto un confronto, in condizioni accelerate per un mese, il picco di ossidazione può crescere fino a oltre lo 0,3%, senza controllo.

Prodotti di rimozione degli acidi grassi
Questa è un'impurezza unica del tilpeptide. La sua catena laterale di acido grasso (acido eicosandioico) è attaccata alla lisina attraverso un legante e questa modifica può essere parzialmente eliminata durante la sintesi o la conservazione, con il risultato che l'acido grasso-rimuove le impurità. In modo più problematico, la perdita può verificarsi in posizioni diverse - tra l'acido grasso e il linker, o tra il linker e il peptide - risultando in impurità diverse. Abbiamo sintetizzato per i nostri clienti diverse impurità legate agli acidi grassi-, che vanno dalla perdita completa a solo una piccola sezione.

Dimeri/polimeri
Due o più molecole di tipeptide si raggruppano per formare un dimero o superiore. Il peso molecolare del dimero è due volte quello del picco principale e spesso è un picco ampio sull'HPLC, quindi deve essere separato e purificato in modo speciale prima di poter essere utilizzato come controllo. Abbiamo preparato i dimeri e sono stati necessari diversi cicli di purificazione per ottenere una purezza superiore al 95%.

Impurità correlate al linker-
La modificazione del tilpeptide con acido grasso utilizza un linker (ad esempio, -Glu, PEG, ecc.) e questo linker stesso può produrre reazioni collaterali durante la sintesi, generando impurità con linker mancanti o incompleti. Questo tipo di impurità non si trova nei peptidi comuni, ma è esclusivo del tilpeptide, che deve essere studiato in modo specifico.

Impurità deamidate
L'asparagina (Asn) e la glutammina (Gln) vengono facilmente deamidate in condizioni acide o di riscaldamento, dando luogo a isomeri. Nella sequenza del tilpeptide sono presenti diversi Asn e Gln e l'impurezza di deammidazione appare spesso nel test di degradazione forzata, pertanto è necessario utilizzare il prodotto di controllo per individuare l'impurezza.

Diastereoisomeri
Durante la sintesi a catena lunga, i singoli amminoacidi possono subire racemizzazione, dando origine a diastereoisomeri. Il contenuto di questo tipo di impurità di solito non è elevato, ma gli esperti lo chiederanno al momento della dichiarazione ed è meglio avere un prodotto di controllo per conferma.

Molte di queste impurità non possono essere acquistate e devono essere sintetizzate su misura. Abbiamo realizzato molti progetti sulla personalizzazione delle impurità tilpeptidiche, coprendo tutte le categorie sopra indicate.

La cancellazione della serie peptidica
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, con conferma MS e NMR. Abbiamo sintetizzato una serie di peptidi con una spaziatura di 5 aminoacidi dal terminale N- al terminale C-.

Impurità ossidanti
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95% e possiamo fornire lo spettro LC-MS per confermare il grado di ossidazione. Il solfossido e il solfone vengono separati mediante HPLC e possiamo fare entrambe le cose.

Prodotti di rimozione degli acidi grassi
Questa è una delle impurità più difficili con cui lavorare nel tilpeptide. La catena degli acidi grassi può essere completamente interrotta o parzialmente interrotta (ad esempio mancano gli ultimi atomi di carbonio). Possiamo sintetizzare una serie di varianti per le diverse posizioni della catena. In uno dei progetti più complicati che abbiamo realizzato, il cliente ci ha chiesto di sintetizzare un'impurezza con 8 atomi di carbonio mancanti nella catena degli acidi grassi e ci sono voluti due mesi per farlo bene.

Dimero
I dimeri formati mediante reticolazione o interazioni non-covalenti possono essere preparati con metodi diversi e isolati e purificati per fornire controlli di elevata purezza. I dimeri sono laboriosi da purificare, ma abbiamo l'esperienza per sapere come separare i monomeri.

Impurità correlate al linker-
Il linker (-Glu, PEG, ecc.) potrebbe essere mancante o incompleto, dando origine a una serie di impurità correlate. Possiamo sintetizzare varie varianti con linker mancanti, linker abbreviati o linker non corrispondenti e aiutarvi a costruire gli spettri di tali impurità.

Impurità deamidate
Per i siti Asn e Gln nella sequenza, possiamo preparare controlli delle impurità deamidate mediante degradazione forzata o sintesi mirata. La differenza di peso molecolare dopo la deammidazione è solo 1, che non è facile da distinguere mediante MS, quindi di solito utilizziamo NMR o condizioni cromatografiche speciali per confermare.

Altre impurità personalizzate
Se trovi una nuova impurità sconosciuta nella tua ricerca, possiamo aiutarti ad analizzarne la struttura e sintetizzarla. Inviaci i campioni, eseguiremo l'analisi LC-MS, dedurremo la struttura, quindi la sintesi direzionale e quindi confronteremo il tempo di ritenzione e lo spettro di massa per confermare l'accordo. Abbiamo eseguito questo processo molte volte e il tasso di successo è piuttosto alto.

Sviluppo e validazione di metodi analitici
Quando si imposta un metodo HPLC o LC-MS, è richiesto un controllo delle impurità per la localizzazione, la determinazione della separazione, la verifica dell'intervallo lineare e il recupero. Senza il controllo, alla validazione del metodo manca un pezzo. Molti clienti ci chiedono di eliminare prima alcune impurità chiave per impostare il metodo e poi di compensare lentamente il resto.

Spettrometria di massa eterogenea
Quando viene dichiarato un farmaco generico, è necessaria un'analisi qualitativa e quantitativa completa delle impurità del processo e dei prodotti di degradazione. La posizione, il contenuto e la struttura di ciascuna impurità devono essere confermati da un prodotto di controllo. Abbiamo visto che la dichiarazione delle informazioni è stata inviata da compilare, nove volte su dieci non abbiamo capito le impurità di questo pezzo.

Studi sulla stabilità
Nei test accelerati e di stabilità a lungo termine-, è necessario determinare quali prodotti di degrado sono dominanti e qual è la tendenza dei contenuti. Con il controllo delle impurità, possiamo quantificare e monitorare accuratamente. Un cliente stava analizzando la stabilità del preparato tilpeptide e ha scoperto che un picco di degradazione cresceva molto rapidamente in condizioni accelerate, quindi lo abbiamo analizzato e sintetizzato tramite MS per confermare la struttura, quindi il cliente si è sentito sollevato nel segnalarlo.

Test di rilascio dei lotti
Dopo la commercializzazione, ogni lotto di API o formulazione deve essere testato per la sostanza in questione. I controlli delle impurità sono strumenti essenziali per i test di rilascio.

Informazioni sulle dichiarazioni dei farmaci generici
Gli studi sulle impurità rappresentano una sezione fondamentale delle informazioni di archiviazione. Fornire dati completi sulla profilazione e sul controllo delle impurità riduce significativamente il rischio di un rilascio di revisione.

Caso 1: un'azienda farmaceutica, programma di farmaci generici tilpeptide
Stanno sviluppando una versione generica del tilpeptide e necessitano di un set completo di controlli delle impurità per la convalida del metodo. Abbiamo personalizzato 12 impurità per loro: 5 peptidi mancanti, 2 impurità ossidate, 1 dimero, 2 prodotti di rilascio di acidi grassi e 2 impurità correlate al linker-. Ognuno di essi ha una purezza superiore al 95% ed è accompagnato da dati MS e NMR. Il responsabile del progetto ha affermato: "Le impurità del tilpeptide sono il doppio di quelle degli altri peptidi, ma è possibile produrli tutti e i dati sono completi, il che ci fa risparmiare molto lavoro". Successivamente la validazione del loro metodo è stata completata con successo e ora si stanno preparando per la dichiarazione.

Caso 2: Una società CRO, profilazione delle impurità
Hanno intrapreso un progetto di ricerca di qualità sul tilpeptide, che ha richiesto un'analisi completa delle impurità del processo. Ci hanno inviato i campioni di peptidi grezzi e abbiamo eseguito l'analisi LC-MS, dedotto le possibili strutture di diverse impurità sconosciute, quindi le abbiamo sintetizzate in modo mirato e confrontato i tempi di ritenzione e gli spettri di massa e confermato quattro nuove impurità - due di esse erano correlate al linker- e due di esse erano varianti della perdita di acidi grassi. Il cliente ha utilizzato questi dati per perfezionare i profili di impurità e ha superato con successo l'accettazione del cliente.

Caso 3: Studi sulla stabilità, una società di biotecnologie
Stavano esaminando la stabilità di una formulazione di tilpeptide e hanno scoperto che la quantità di un prodotto di degradazione aumentava rapidamente in condizioni accelerate, ma non sapevano di cosa si trattasse. Abbiamo analizzato il campione mediante LC-MS e abbiamo ipotizzato che si trattasse di un'impurezza di deammidazione in un determinato sito Asn, quindi l'abbiamo sintetizzata in modo mirato e confermata mediante confronto. Hanno stabilito un test utilizzando questo controllo e hanno monitorato accuratamente l'andamento del prodotto di degradazione. Successivamente, quando hanno presentato il rapporto, questa parte dei dati è stata enfatizzata dagli esperti e, a causa dei dati solidi, non è stato concesso alcun compenso.

Il tilpeptide è un prodotto popolare, ma lo studio delle impurità è un lavoro delicato, in particolare i prodotti per l'esfoliazione degli acidi grassi e le impurità correlate ai linker-, che molti produttori non sono in grado di gestire. Se stai effettuando ricerche di qualità o sviluppo generico di tilpeptide e hai bisogno di controlli delle impurità, non esitare a contattarci. Abbiamo lavorato tanto, sappiamo quali sono le difficoltà e sappiamo come venirne a capo.